苦參抗水產(chǎn)病原哈氏弧菌活性物質(zhì)的提取、鑒定及作用機制
摘要：利用單因素實驗、Box-Behnken試驗設(shè)計結(jié)合響應面分析法，從提取溶劑（蒸餾水、50%甲醇、甲醇、50%乙醇、乙醇）、乙醇濃度（60%～100%）、提取溫度（60℃、70℃、80℃、90℃、100℃）、提取時間（60 min、90 min、120min、150 min、180 min）和液料比等對抑菌活性的影響幾方面優(yōu)化苦參抗水產(chǎn)病原哈氏弧菌（Vibrio harveyi）活性物質(zhì)（ASSF）的提取工藝；采用高效液相色譜和標準品比對技術(shù)，鑒定ASSF的抗菌活性化合物；從對哈氏弧菌的生長、細胞膜的完整性和通透性、細胞壁的通透性等方面探討ASSF的作用機理。結(jié)果表明：ASSF的最佳提取條件是：無水乙醇為溶劑，液料比30∶1 m L/g，提取溫度79℃，提取146 min。在此條件下，提取物抑菌圈的實際值為（17.64±0.22）mm，與預測值無顯著性差異。固態(tài)ASSF的得率為（21.17±0.91）%。鑒定出苦參酮是ASSF中的抗哈氏弧菌活性化合物。ASSF和苦參酮的最小抑菌濃度分別為0.125 mg/m L和0.062 5 mg/m L。ASSF對于哈維氏弧菌的抑制作用主要是通過破壞細胞膜的完整性和通透性、細胞壁的通透性抑制細胞的增殖。本研究結(jié)果可為進一步開發(fā)苦參酮在水產(chǎn)病害防治中的應用提供依據(jù)。
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