摘要:通過基因重組技術(shù),敲除鰻弧菌毒力基因vah1,成功構(gòu)建vah1缺失鰻弧菌菌株Δvah1。Δvah1菌株溶血活性下降89.4%,生物膜形成能力下降16%。Δvah1菌株感染凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)的半數(shù)致死量為(9.77±0.50)×105 cfu/mL,相比鰻弧菌野生菌株的半數(shù)致死量(3.16±0.80)×105 cfu/mL提高了2.09倍;相比鰻弧菌野生菌株,Δvah1菌株在凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)肝胰腺的定殖能力明顯下降,對肝胰腺細(xì)胞造成溶解和空泡化的破壞程度也相對較小,肝胰腺免疫相關(guān)基因CAT、SOD、PO、LZM和ACP的表達(dá)水平降低。這些研究結(jié)果表明,vah1缺失影響鰻弧菌對凡納濱對蝦的致病能力,Δvah1菌株為后續(xù)鰻弧菌減毒疫苗或抗鰻弧菌免疫增強(qiáng)劑的制備奠定了基礎(chǔ)。