摘要:以海藻酸鈉為包被體,(魚師)諾卡氏菌(Nocardia seriolae)全菌滅活疫苗為內(nèi)芯,制備(魚師)諾卡氏菌口服微球疫苗,口灌體質(zhì)量(45±5)g的珍珠龍膽石斑魚(Epinephelus fuscoguttatus♀×E. lanceolatus♂)。一周灌3 d停4 d,4周后每尾腹腔注射100μL(魚師)諾卡氏菌液,攻毒濃度為1×10~8CFU/mL,對照組口服生理鹽水微球,然后測定保護率及肝中堿性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSZ)以及過氧化氫酶(CAT)活性,用RT-PCR研究相關(guān)免疫基因的表達。結(jié)果顯示,口服疫苗免疫保護率(RPS)為67%,疫苗組ACP活力在免疫1周時達到峰值;CAT活力在免疫后先升高再降低,在免疫1周時達峰值,第3周時仍與對照組差異顯著;LSZ活力第2 d、21 d、28 d顯著低于對照組;SOD活力整體顯著低于對照組;免疫組與對照組相比,口服疫苗免疫后的珍珠龍膽石斑魚激發(fā)TLR信號通路,促進TLR2、TLR3、MyD88基因表達量上調(diào)。細胞因子類相關(guān)基因IL-12p40、TNF-α轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β、免疫球蛋白IgM,及適應(yīng)性免疫相關(guān)基因MHC表達量均有上調(diào),但不同組織上調(diào)程度不同。