摘要：為探究鰤魚諾卡氏菌(Nocardia seriolae)強毒株LY20810 F1與其傳代弱毒株LY20810 F110的特性差異,比較了兩個菌株的生物學特征、毒力基因序列、致病力及引起大口黑鱸免疫反應的差異,并評價了弱毒株LY20810 F110對大口黑鱸的免疫保護效果。結果表明,通過BHI培養(yǎng)基連續(xù)傳代培養(yǎng)110代次后,菌株LY20810 F110的菌落、菌體形態(tài)發(fā)生顯著變化,其生長速度較原始毒株LY20810 F1快1倍以上。通過比較兩株菌的10個毒力基因序列,發(fā)現(xiàn)菌株LY20810 F110的SodC和ESAT6基因發(fā)生了單位點突變。致病力測試結果顯示,強毒株LY20810 F1以0.1 mL 1×10～7 cfu/mL攻毒劑量感染大口黑鱸, 30d內魚累積死亡率為100%,而傳代弱毒株LY20810 F110在相同劑量下未造成魚死亡。強毒株LY20810 F1攻毒3d后引起脾臟、頭腎中IL-1β、IL-10、TNF-α、IFN-γ等炎癥細胞因子顯著上調,表明細菌感染引起炎癥風暴。傳代弱毒株LY20810 F110在感染中后期(14d和28d)誘導包括IgM、CD4-α、CD8-α、MHCI-α等8種免疫因子的上調。免疫效果評價結果顯示,弱毒株LY20810 F110的注射、浸泡免疫(1×10～8 cfu/mL)對大口黑鱸的相對保護率分別為75.0%和66.7%,有效降低了鰤魚諾卡氏菌入侵造成大口黑鱸脾臟和頭腎的病理損傷。以上結果表明,鰤魚諾卡氏菌傳代弱毒株LY20810 F110是安全有效的弱毒疫苗候選株,將為諾卡氏菌減毒疫苗的研制提供科學依據。
